Cum se face o spectrofotometrie

O spectrofotometrie este o tehnică experimentală utilizată pentru a măsura concentrația unui dizolvat într-o soluție particulară, calculând cantitatea de lumină absorbită de acesta. Această tehnică este puternică deoarece anumiți compuși vor absorbi diferite lungimi de undă de lumină cu intensități diferite. Analizând lumina care trece prin soluție, puteți identifica substanțele din beton dizolvate în această soluție și care este concentrația acestor substanțe. Un spectrofotometru este dispozitivul folosit pentru a analiza soluțiile dintr-un laborator de cercetare.

pași

2

Curățați cuvele sau eprubetele. Dacă faceți o practică de laborator pentru școală, este posibil să utilizați tuburi de testare de unică folosință care nu trebuie curățate. Dacă utilizați cuve sau capsule reutilizabile, asigurați-vă că sunt curățate temeinic înainte de fiecare utilizare. Clătiți cu atenție fiecare cuvă cu apă deionizată.

3

Se toarnă cantitatea corespunzătoare de probă în cupă. Unele cuve au un volum maxim de 1 mililitru (ml), în timp ce eprubetele pot avea un volum maxim de 5 ml. În timp ce laserul care produce lumina trece prin lichid și nu o parte goală a recipientului, veți obține o lectură riguroasă.

4

Pregătiți soluția de control. Soluția de control conține numai solventul chimic în care dizolva substanța dizolvată. De exemplu, dacă ați avea sare dizolvată în apă, soluția de control va fi numai apă. Dacă ați vopsit apa roșie, controlul ar trebui să fie de asemenea roșu. Trebuie să aibă același volum ca și soluția de analizat și să fie stocată în același tip de recipient.

5

Curățați partea exterioară a găleată. Înainte de a introduce cuva în spectrofotometru, asigurați-vă că este cât mai curată posibil pentru a evita interferența cu particule de praf sau murdărie. Folosind o țesătură de țesut cu tratament anti-scame, îndepărtați eventualele picături de lichid sau praf care pot apărea pe partea exterioară a cuvei.

2

Calibrați dispozitivul utilizând soluția de probă. Așezați soluția de probă în compartimentul pentru probe și închideți capacul. Într-un spectrofotometru analog, va exista un ecran cu un ac care se deplasează în funcție de intensitatea detecției luminii. Când eșantionul este înăuntru, ar trebui să vedeți că acul se mișcă spre dreapta. Înregistrați valoarea respectivă, în cazul în care aveți nevoie mai târziu. Cu soluția de control aflată încă în mașină, reglați acul la zero utilizând butonul de reglare.

3

Scoateți soluția de control și verificați calibrarea. Odată ce eșantionul este îndepărtat, acul ar trebui să rămână la zero sau citirea digitală să rămână zero. Returnați soluția de control pe dispozitiv și asigurați-vă că nu există modificări ale acului sau lectură. Dacă dispozitivul este bine calibrat cu soluția de control, totul ar trebui să rămână la zero.

4

Măsurați absorbția probei. Îndepărtați soluția de control și plasați proba experimentului în aparat. Așteptați aproximativ 10 secunde, până când acul se stabilizează sau până când numerele digitale se vor opri. Înregistrează valorile procentului de transmisie sau de absorbție.

5

Repetați eșantionul cu diferite lungimi de undă ale luminii. Proba poate avea mai mulți compuși necunoscuți, a căror absorbție va varia în funcție de lungimea de undă. Pentru a elimina incertitudinile, repetați citirile la intervale de 25 nm peste spectru. Acest lucru vă va permite să detectați alte componente chimice pe care le suspectați că sunt de asemenea prezente.

2

Reprezintă valorile absorbției față de valorile lungimii de undă într-un grafic. Valoarea absorbanței este prezentată pe axa verticală și vizavi de lungimea de undă a luminii dat pentru un anumit experiment pe axa orizontală x. Se trasează valorile absorbanței maxime pentru fiecare lungime de undă a luminii eșantionului testat spectrul de absorbție al probei și identifică compușii care alcătuiesc substanța eșantionului și proporțiile acestora.

3

Comparați graficul spectrului de absorbție cu cadrele cunoscute pentru elementele specifice. Fiecare compus are un spectru unic de absorbție și va produce întotdeauna un vârf la aceeași lungime de undă de fiecare dată când este măsurat. Prin compararea graficului elementelor necunoscute cu compușii cunoscuți, puteți identifica substanțele dizolvate în soluție.